一、样品稀释

先将酸奶样品搅拌均匀，用无菌移液管吸取样品25 ml加入盛有225 ml无菌水的三角瓶中，在旋涡均匀器上充分振摇，务必使样品均匀分散，即为10：1的样品稀释液，然后根据对样品含菌量的估计，将样品稀释至适当的稀释度。

二、制平板

选用2~3个适合的稀释度，培养皿贴上相应的标签，分别吸取不同稀释度的稀释液1 ml置于平皿内，每个稀释度作2个重复。然后用溶化冷却至46 ℃左右的MRS或改良CHALMERS培养基倒平皿，迅速转动平皿使之混合均匀，冷却成平板。

三、培养和计数

将平皿倒置于40 ℃恒温箱内培养24~48 h，观察长出的细小菌落，计菌落数目，按常规方法选择30~300个菌落平皿进行计算。

1.  指示剂显色

由于产酸菌落周围能使CaCO3产生溶解圈，酸碱指示剂应呈酸性显色反应。

2.  镜检形态

必要时，可挑取不同形态菌落制片镜检确定是乳杆菌或乳链球菌。保加利亚乳杆菌呈杆状，成单杆、或双杆菌或长丝状。嗜热链球菌，呈球状，成对、或短链、或长链状。

3.  参照比较

据介绍，改良CHALMERS培养基的检出率较MRS培养基高，M17培养基较适合于乳球菌的培养，在检测时可同时使用多个培养基作比较。